Wewnątrznosowe leczenie Poly-IC zaostrza gruźlicę u myszy poprzez rekrutację płucną populacji monocytów / makrofagów dopuszczających patogeny ad 5

Rzeczywiście, populacja komórek CD11b + Gr1int z płuc zainfekowanych, leczonych lekiem myszy wykazywała znaczący spadek IFN-y. ekspresja receptorów w porównaniu z nieleczonymi, zakażonymi zwierzętami. Niemniej jednak redukcja IFN-y ekspresja receptora była również obserwowana w CD11b + Gr1. populacja, która nie wykazała zwiększonych obciążeń bakteryjnych po leczeniu Poly-ICLC (dodatkowa Figura 6). Ponadto, nie wykryto różnicy w wiadomości Nos2 i ekspresji białka NOS2 w populacji komórek CD11b + Gr1int odzyskanych od myszy zakażonych kontrolnymi w porównaniu do leczonych lekiem (Suplemental Figura 7). Razem powyższe wyniki sugerują, że obniżony IFN-y monocytów / makrofagów Ekspresja receptora, chociaż może przyczyniać się do zwiększonego wzrostu bakterii obserwowanego w płucach myszy traktowanych Poly-ICLC, nie może być sama w sobie głównym mechanizmem leżącym u podstaw tego wyniku. Upośledzona kontrola zakażenia M. tuberculosis wywołana przez leczenie Poly-ICLC jest zależna od CCR2. Następnie zajęliśmy się mechanizmem odpowiedzialnym za gromadzenie subpopulacji komórek CD11b + Gr1int w płucach zainfekowanych myszy, leczonych Poly-ICLC. Aby to zrobić, zbadaliśmy ekspresję, wykorzystującą PCR w czasie rzeczywistym w tkance płucnej, zestawu genów receptorów chemokin i chemokin, o których wiadomo, że biorą udział w rekrutacji komórek szpikowych (Figura 7A). Nie zaobserwowano znaczących różnic w ekspresji Cxcl1 i jego receptora Cxcr2 w tych samych 2 grupach zwierząt. Przeciwnie, zaobserwowaliśmy około 10-krotne wzmocnienie transkryptów kodujących Ccl2 w płucach Poly-ICLC. w porównaniu do zwierząt zakażonych PBS. Ta indukcja była zależna od sygnalizacji IFN typu I, ponieważ nie obserwowano żadnych zmian, gdy zakażone myszy z niedoborem Ifnabr były leczone za pomocą Poly-ICLC. Figura 7 Zarówno rekrutacja komórek CD11b + Gr1int, jak i zaostrzenie zakażenia M. tuberculosis po leczeniu Poly-ICLC zależą od ekspresji CCR2. (A) Poziomy ekspresji mRNA Cxcl1, Cxcr2 i Ccl2, określane przez PCR w czasie rzeczywistym w płucach zwierząt zainfekowanych M. tuberculosis p, traktowanych PBS (puste kółka) i Poly-ICLC (wypełnione kółka). Przedstawione wyniki przedstawiają wzrost krotności względem obserwowanego u nieleczonych, nie naiwnych myszy, z okręgami przedstawiającymi poszczególne myszy. Dane zebrano z 3 niezależnych eksperymentów z podobnymi wynikami. (B) Reprezentatywne wykresy punktowe cytometrii przepływowej CD11b + Grl2, CDllb + Gr1int i CD11b + Gr1high leukocytów płucnych izolowanych z Poly-ICLC. lub traktowane PBS myszy WT zakażone M. tuberculosis lub zwierzęta z niedoborem Ccr2. Liczby w obrębie lub obok każdego pola odnoszą się do częstotliwości komórek w każdej bramce. (C) Mobobakterie płucne w traktowanych PBS (puste kółka) i potraktowanych Poly-ICLCa (okręgi w kształcie zamkniętym) myszy z niedoborem WT i Ccr2. Kręgi reprezentują pojedyncze zwierzęta. Przedstawione dane reprezentują 3 niezależne eksperymenty. (A i C) Poziome linie reprezentują porównania między poliklonalnym ICLC. i myszy PBS, leczonych PBS, zakażonych M. tuberculosis. ** P <0,01. Ekspresja CCL2 była wcześniej związana z naciekiem monocytowym w kilku chorobach zapalnych, a badania na myszach z niedoborem Ccr2 wykazały główną rolę dla tego receptora chemokinowego w emigracji monocytów i makrofagów ze szpiku kostnego i ich rekrutacji do miejsc tkanki, w których CCL2 jest wyrażone (20, 21). W celu określenia, czy zwiększona ekspresja Ccl2 w płucach potraktowanego Poly-ICLCa, myszy zakażone M. tuberculosis. Odzwierciedlają funkcję dla tej chemokiny podczas rekrutacji komórek CDllb + Gr1int, my zarażeni i leczeni lekami myszy z niedoborem CCR2, receptora dla CCL2. Zwiększona częstotliwość komórek CD11b + Gr1int obserwowana po traktowaniu przez Poly-ICLC zainfekowanych myszy WT nie była obserwowana u zwierząt bez CCR2 (Figura 7B). Zgodnie z wcześniejszymi badaniami (22), myszy z niedoborem Ccr2 wykazywały większe obciążenia bakteryjne niż myszy WT przy braku leczenia lekiem (Figura 7C). Ważne jest jednak, że leczenie lekiem nie powodowało wzrostu obciążenia bakteryjnego u zwierząt z nokautem receptora chemokin (fig. 7C). Wszystkie te obserwacje wiązały zależną od CCL2-CCR2a rekrutację komórek CD11b + Gr1int do zaostrzenia zakażenia M. tuberculosis obserwowanego po podaniu Poly-ICLC. Dyskusja Gruźlica zagraża jednej trzeciej populacji świata i jest główną przyczyną śmierci jednego czynnika zakaźnego. Cytokiny, takie jak IFN-y i TNF-a wykazano, że odgrywają ważną rolę w oporności gospodarza i / lub immunopatologii w zakażeniu M. tuberculosis i reprezentują potencjalne punkty interwencji immunologicznej w kontrolowaniu tej choroby (23. 25) [więcej w: studia ratownik medyczny, usuwanie tatuażu warszawa, centrum medyczne bazarowa ] [więcej w: jak długo gotować ciecierzycę, betaserc opinie, rowatinex cena ]