GSK-3 jest centralnym regulatorem patologii związanych z wiekiem u myszy ad 8

Ogranicza to do wyciągnięcia jakichkolwiek wiążących wniosków dotyczących roli GSK-3 w ogóle i znosi zdolność do analizowania specyficznych ról 2 izoform GSK-3, ponieważ nie istnieją żadne specyficzne dla izoformy inhibitory. Co więcej, szlak przekazywania sygnałów prowadzący do aktywacji autofagii wydaje się być inny, ponieważ nie widzieliśmy żadnego zaangażowania białka TIP60 lub AMPK (dane nie pokazane). Co najważniejsze, patologiczne konsekwencje zmian aktywności GSK-3 i autofagii dla organizmów wielokomórkowych, w tym regulacja starzenia, nie zostały omówione w Lin i in. Podsumowując, uważamy, że nasze badania definiują nową i kluczową rolę GSK-3. w zapobieganiu przedwczesnemu starzeniu się w kilku układach narządów. Continue reading „GSK-3 jest centralnym regulatorem patologii związanych z wiekiem u myszy ad 8”

GSK-3 jest centralnym regulatorem patologii związanych z wiekiem u myszy ad 7

Obserwowaliśmy znaczny wzrost ROS w sercu i mięśniach szkieletowych myszy KO, a to może sprzyjać starzeniu. Powiedział, że nie jest jasne, jak skreślenie GSK-3. może doprowadzić do zwiększenia produkcji ROS, a określenie mechanizmu wykracza poza zakres tej pracy. Dysponujemy jednak danymi mechanistycznymi dotyczącymi rozregulowania dwóch kluczowych ścieżek, z których obie znacząco rzutują na autofagię. Inaktywacja mutacji w białkach IRS, centralnych komponentach szlaku sygnałowego insuliny / IGF-1, przedłuża okres życia u różnych gatunków. Continue reading „GSK-3 jest centralnym regulatorem patologii związanych z wiekiem u myszy ad 7”

GSK-3 jest centralnym regulatorem patologii związanych z wiekiem u myszy ad 6

Gwałtowny strumień autofagiczny był upośledzony w fibroblastach GK3a KO. W tych doświadczeniach leczenie bafilomycyną A1 znacząco zmniejszało liczbę autofagosomów w fibroblastach Gsk3a KO w porównaniu z fibroblastami WT, potwierdzając rolę GSK-3. w tworzeniu autofagosomu. Na koniec chcieliśmy określić kluczowy (-e) motor (y) głębokich fenotypów, które obserwowaliśmy w mięśniach poprzecznie prążkowanych myszy GK3a KO, przy czym nasza hipoteza głosiła, że niepohamowana aktywacja mTOR ma centralne znaczenie w patologii. Dlatego też leczono 1- i 2-letnimi myszami Gsk3a KO i WT inhibitorem mTOR, ewerolimusem. Continue reading „GSK-3 jest centralnym regulatorem patologii związanych z wiekiem u myszy ad 6”

GSK-3 jest centralnym regulatorem patologii związanych z wiekiem u myszy ad 5

Zatem, prozapalne cytokiny są rzeczywiście zwiększone u myszy KO. Mechanizmy regulujące proces starzenia. Następnie zbadaliśmy potencjalne mechanizmy molekularne leżące u podstaw przyspieszenia starzenia. Zauważyliśmy wzrost ekspresji IRS-1, bezpośredniego celu GSK-3, ale, zgodnie z naszymi wcześniejszymi badaniami (34), nie było to związane ze znacznym wzrostem aktywności Akt, jak określono przez fosforylację seryny-473 Akt (ryc. 7, A i B). Continue reading „GSK-3 jest centralnym regulatorem patologii związanych z wiekiem u myszy ad 5”

Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS ad 5

Sześć makaków wykazujących zwiększone wiązanie PET [11C] (R) -PK11195 wykazywało różne stopnie SIVE. Makak 9231 wykazał pewne naciekanie makrofagów w zwojach podstawy bez innych klasycznych cech histopatologicznych SIVE, co odpowiadało 29% wzrostowi swoistego wiązania [11C] (R) -PK111958 in vivo w zwojach podstawy (tabela 2) i mogło reprezentować przedhecefaliczny stan choroby. Pozostałe makaki albo wykazywały subtelne zmiany zapalne w postaci nacieków komórek okołonaczyniowych jednojądrzastych albo nie wykazywały żadnych znaczących nieprawidłowości, a zatem uznano je za kontrole nie-fikcyjne. Te makaki wykazywały marginalny lub nie wychwyt i wiązanie PET [11C] (R) -PK11195 (Tabela 2). Zwiększone specyficzne wiązanie [11C] (R) -PK111958 in vivo było skorelowane z diagnozą SIVE po śmierci. Continue reading „Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS ad 5”

Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS czesc 4

Różne obszary anatomiczne zidentyfikowano za pomocą mikroskopu rozbiorczego i zaznaczono na szkiełkach. Skrawki wybarwione immunologicznie zeskanowano i oznaczono ilościowo na mikroskopie konfokalnym laserowym (LSM 150, Carl Zeiss GmbH, Heidelberg, Niemcy). Ten zakres jest wyposażony w laser argonowy z liniami emisji pierwotnej 458 nm, 477 nm, 488 nm i 514 nm. Każda sekcja została zeskanowana wzdłuż osi z, aby zdefiniować środkową płaszczyznę optyczną użytą do kwantyfikacji (262 144 piksele / płaszczyzna, piksel = 0,25 mm2). Analizę obrazu przeprowadzono na komputerze Silicon Graphics (Windows NT 4.0 Operating System, Microsoft Corp., Redmond, Washington, USA) przy użyciu oprogramowania LSM (wersja 3.0, Carl Zeiss GmbH). Continue reading „Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS czesc 4”

Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS cd

Skany PET [11C] (R) -PK11195 otrzymane przed zakażeniem SIV pozwoliły każdemu zwierzęciu służyć jako jego własna kontrola ze względu na trudność zidentyfikowania spójnego regionu mózgu pozbawionego patologii choroby, służącego jako tkanka referencyjna. MRI. Obrazowanie wykonano za pomocą skanera MRI o przekątnej 3,0 Tesli (General Electric Medical Systems, Milwaukee, Wisconsin, USA) działającego w wersji VH3 oprogramowania skanującego. Skaner ma szczytową siłę gradientu 4 G / cm i szczytową prędkość zabijania 15 000 G / cm / s. Zaprojektowana na zamówienie, kwadraturowa cewka końcowa klatki (o średnicy 15 cm, 32 nogi) została wykorzystana do zeskanowania zwierząt leżących na stole obrazowym. Continue reading „Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS cd”

Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS ad

W obecnym badaniu wykorzystano zarówno obrazowanie PET in vivo, jak i analizę wiązania tkanek pośmiertnych w celu wykazania zwiększonego specyficznego wiązania zarówno [11C] (R) -PK11195 i [3H] (R) -PK11195 z makrofagami u makaków SIVE. Zwiększone wiązanie specyficzne dla PK11195 w SIVE sugeruje, że PET wykorzystujący [11C] (R) -PK11195 może umożliwić monitorowanie in vivo ewolucji i leczenia demencji HIV. Metody Zwierzęta. Wszystkie zwierzęta były trzymane i utrzymywane zgodnie z surowymi standardami Stowarzyszenia Oceny i Akredytacji Opieki nad Zwierzętami Laboratoryjnymi, a eksperymenty zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania Uniwersytetu w Pittsburghu. Continue reading „Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS ad”

Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS

Zakażenie HIV u ludzi i zakażenie małpim niedoborem odporności (SIV) u makaków powoduje zapalenie mózgu u około jednej czwartej zakażonych osobników i charakteryzuje się naciekiem mózgu z zainfekowanymi i aktywowanymi makrofagami. 1- (2-chlorofenylo) -N-metylo-N- (1-metylopropylo) -3-izochinolino-karboksyamid (PK11195) jest ligandem specyficznym dla obwodowego receptora benzodiazepinowego występującego w dużych ilościach na makrofagach i jest wyrażany w niskich poziomach w niezainfekowanym mózgu . Postawiliśmy hipotezę, że tomografia emisyjna pozytronowa (PET) z wyznakowaną węglem-11p formą R-enancjomeru PK11195 ([11C] (R) -PK11195) może obrazować makrofagi mózgu, a tym samym rozwój zapalenia mózgu in vivo. Wiązanie [11C] (R) -PK11195 oceniano w mózgu przy użyciu PET u 11 makaków zainfekowanych SIV, z których sześć wykazywało zwiększone wiązanie in vivo. Badanie poporodowe mózgu u tych sześciu makaków wykazało zapalenie mózgu, natomiast makaki, które nie wykazywały wzrostu wiązania [11C] (R) -PK11195, nie rozwinęły zapalenia mózgu wywołanego SIV. Continue reading „Obrazowanie PET makrofagów mózgu za pomocą obwodowego receptora benzodiazepinowego w modelu makaka neuroAIDS”

Wewnątrznosowe leczenie Poly-IC zaostrza gruźlicę u myszy poprzez rekrutację płucną populacji monocytów / makrofagów dopuszczających patogeny

Wykazano, że IFN typu I wywiera główny wpływ regulacyjny na wynik infekcji bakteryjnych. Aby ocenić wpływ egzogennie indukowanego IFN typu I na wynik zakażenia Mycobacterium tuberculosis, myszy eksponowane na działanie patogenu traktowano donosowo kwasem polioksynylo-policytidylowym skondensowanym z poli-1-lizyną i karboksymetylocelulozą (Poly-ICLC), środkiem przeznaczonym do stymulacji długotrwała produkcja IFN typu I na wysokim poziomie. Myszy WT leczone lekiem, zakażone M. tuberculosis, ale nie myszy pozbawione IFN-y receptor (IFNyR, znany także jako IFNAR1), wykazywał znaczne zwiększenie obciążenia prącia płucnego, któremu towarzyszyła powszechna martwica płuc bez wykrywalnego osłabienia funkcji efektorowej Th1. Co ważne, płuca z myszy zakażonych M.-gruźlicą. Continue reading „Wewnątrznosowe leczenie Poly-IC zaostrza gruźlicę u myszy poprzez rekrutację płucną populacji monocytów / makrofagów dopuszczających patogeny”