Ochronna rola receptora adenozynowego A1 w urazie płucnym zależnym od adenozyny czesc 4

Zwiększona produkcja cytokin i chemokin w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR. Aby zbadać udział prozapalnych mediatorów we wzmożonym zapaleniu płuc obserwowanym u myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR, poziomy transkryptu cytokiny i chemokiny były monitorowane w ekstraktach RNA z całych płuc. Poziomy transkryptów dla IL-4 nie były podwyższone w płucach ADA. /. myszy zawierające A1AR; jednakże były one znacząco podwyższone w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR (Figura 5). Transkrypty IL-13 były podwyższone w płucach ADA. /. myszy, a poziomy były znacznie podwyższone w przypadku braku A1AR (ryc. 5). Transkrypty IL-6 były podwyższone w płucach ADA. /. myszy, ale nie zmieniła się po usunięciu A1AR (Figura 5). Spośród badanych chemokin stwierdzono, że poziomy eotaksyny 2 i chemokiny regulowanej przez grypę i aktywację (TARC) są znacząco zwiększone w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR (Figura 6). Stwierdzono, że poziomy transkryptów innych cytokin i chemokin (IL-5, IL-9, IL-17, TNF-a, TGF-pi, IFN-a, Rantes i CCR3) nie uległy zmianie (dane nie pokazane). Te dane pokazują, że usunięcie A1AR prowadzi do nadmiernej ekspresji IL-4, IL-13, eotaksyny 2 i TARC w płucach ADA. /. myszy. Figura 5 Poziomy transkrypcji cytokin w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR. Poziomy transkryptów IL-4, IL-13 i IL-6 określono w ekstraktach z całych płuc z myszy po 14 dniach po urodzeniu z użyciem ilościowego RT-PCR. Dane przedstawiono jako średnie pg transkryptów / | g RNA. SEM; n = 8 dla każdego. * P. 0,05 w porównaniu do myszy ADA +; ** P. 0,05 w porównaniu z myszami ADA p / AlAR + / +. Figura 6 Poziomy transkrypcji chromheminy w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR. Poziomy transkryptów eotaksyny 1, eotaksyny 2, TARC i MCP-3 określono w ekstraktach z całych płuc z myszy po 14 dniach po urodzeniu, stosując ilościowy RT-PCR. Dane przedstawiono jako średnie pg transkryptów / | g RNA. SEM; n = 8 dla każdego. * P. 0,05 w porównaniu do myszy ADA +; ** P. 0,05 w porównaniu z myszami ADA p / AlAR + / +. Poziomy adenozyny i AR w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR. Wiele fenotypów płucnych obserwowanych w ADA. /. myszy przypisano zwiększeniu stężenia płuc-adenozyny (11, 31, 34). Poziomy płuc-adenozyny monitorowano w celu ustalenia, czy nadmierne fenotypy płucne u myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR były związane ze zwiększonymi stężeniami adenozyny. Płuca ADA. /. myszy zawierające A1AR wykazywały około 10-krotny wzrost poziomów adenozyny w porównaniu z kontrolami ADA +, podczas gdy poziomy adenozyny w płucach były 20-krotnie większe w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR (Figura 7A). Zwiększone nagromadzanie się adenozyny w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR jest zgodne z nasilonym stanem zapalnym i uszkodzeniem tkanek w tym modelu. Figura 7 Poziomy adenozyny i AR w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR. (A) Poziomy adenozyny mierzono w płucach myszy 17 dnia po urodzeniu, stosując HPLC z odwróconymi fazami. Dane przedstawiono jako średnia nmol adenozyna / mg białka. SEM; n = 8 dla każdej grupy. * P. 0,05 w porównaniu do myszy ADA + ADA + / +; ** P. 0,05 w porównaniu do myszy ADA +; *** P. 0,05 w porównaniu z myszami ADA p / AlAR + / +. (B) Poziomy transkryptów AR określono w ekstraktach z całych płuc z myszy po 14 dniach po urodzeniu za pomocą ilościowego RT-PCR. Dane przedstawiono jako średnie transkrypty / 100 ng RNA. SEM; n = 6 dla każdego. * P. 0,05 w porównaniu do myszy ADA +. Następnie zbadano poziomy transkryptu płuc PBS w celu określenia, czy wystąpiły efekty kompensujące ekspresję AR w przypadku braku A1AR. Stwierdzono, że poziomy transkrypcji dla A1AR, A2BAR i A3AR wzrastają w ekstraktach RNA z całych płuc z ADA. /. myszy, podczas gdy poziomy A2AAR zmniejszyły się (Figura 7B). Jednak nie było różnic w poziomach transkryptu płuc między ADA + i ADA. /. myszy z lub bez A1AR z wyjątkiem transkryptu A1AR, który nie został wykryty w A1AR. /. myszy (Figura 7B). Odkrycia te pokazują, że nie ma żadnych kompensacyjnych zmian w poziomach transkryptów A2AAR, A2BAR i A3AR w płucach po usunięciu A1AR. Niszczenie pęcherzyków w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1. Pęcherzykowe drogi oddechowe ADA. /. myszy były znacznie powiększone w dniu 14 po urodzeniu (Figura 2C), co sugeruje aktywację szlaków proteolitycznych, które mogą powodować zmiany demielktyczne. Jednak poprzednie badania wykazały, że defekty rozwoju wyrostka zębodołowego przyczyniają się do powiększenia pęcherzyków obserwowanych w ADA. /. myszy (11, 35). W związku z tym, w celu oceny wkładu A1AR w zniszczenie pęcherzyków widziane w ADA. /. myszy, ADA. /. myszy z lub bez A1AR były utrzymywane na terapii enzymatycznej ADA od urodzenia, aby umożliwić prawidłowy rozwój pęcherzyków płucnych (36)
[patrz też: proste kroki taneczne, duszniki zdrój sanatorium, ile kalorii ma chleb orkiszowy ]
[więcej w: rowatinex cena, relewium, ada obrazy ]