Ochronna rola receptora adenozynowego A1 w urazie płucnym zależnym od adenozyny ad

Na przykład niektóre badania wykazały, że sygnalizacja A1AR może sprzyjać aktywacji neutrofili (18) i monocytów (19, 20), podczas gdy inne sugerują, że sygnalizacja A1AR jest zaangażowana w szlaki przeciwzapalne i ochronne w stanach zapalnych i urazach nerwowych (21) oraz w uszkodzenie serca (22) i nerek (23, 24). W płucach aktywacja A1AR jest zaangażowana w regulację zwężenia oskrzeli w modelach królików alergicznych (25-27), co sugeruje prowokacyjną rolę sygnalizacji A1AR w ostrych fazach astmy. Podobnie wykazano, że antagonizm receptora A1AR jest korzystny w osłabianiu reperfuzji niedokrwiennej (28) i urazowi płuc indukowanemu przez endotoksyny (29), co sugeruje prozapalną rolę sygnalizacji A1AR w ostrym uszkodzeniu płuc. Jednak nie zbadano roli A1AR w procesach zapalnych i urazowych obserwowanych w przewlekłych fazach choroby płuc. Opracowaliśmy model urazu płucnego, w którym pośredniczy adenozyna, który pozwolił nam zbadać konsekwencje podwyższenia poziomu adenozyny w zapaleniu płuc i urazach. Dezaminaza adenozyny (ADA) jest purynowym enzymem katabolicznym odpowiedzialnym za deaminację adenozyny do inozyny, a myszy, które nie mają tego enzymu, rozwijają aspekty przewlekłego uszkodzenia płucnego w połączeniu z podwyższeniem poziomu adenozyny w płucach (11). Widoczne cechy płuc obejmują degranulację komórek tucznych, postępujące zapalenie dróg oddechowych charakteryzujące się zwiększeniem makrofagów w drogach oddechowych i eozynofilami, metaplazją śluzu, powiększeniem dróg oddechowych, zwłóknieniem i nadreaktywnością dróg oddechowych (11, 30, 31). Model ten okazał się przydatny w badaniu specyficznych szlaków sygnałowych związanych z urazem płuc wywołanym adenozyną (32, 33). W bieżącym badaniu zbadaliśmy funkcję A1AR w zapaleniu płuc i wywołanym adenozyną zapaleniu płuc i urazie przez genetyczne usunięcie funkcjonalnego genu A1AR od myszy z niedoborem ADA. Wyniki wskazują, że A1AR pełni rolę przeciwzapalną w rozwoju zapalenia płuc i niszczenia pęcherzyków u myszy z niedoborem ADA, co sugeruje rolę ochronną tego receptora w regulacji zaburzeń płucnych, w których poziomy adenozyny są podwyższone. Wyniki Transkrypty A1AR są podwyższone w płucach ADA. /. myszy. Przeprowadzono półilościowy RT-PCR, aby określić poziomy transkryptów A1AR w płucach myszy z niedoborem ADA (ADA A / P). Transkrypty A1AR były wykrywalne w płucach ADA-zawierających (ADA +) i ADA. /. myszy, z widocznym wzrostem w płucach ADA. /. myszy (Figura 1A). Odkrycia te potwierdzono za pomocą ilościowego RT-PCR, który wykazał średni 3-krotny wzrost transkryptów A1AR w ekstraktach RNA z całych płuc (Figura 1B) i 50-krotny wzrost transkryptów A1AR w RNA izolowanym z płukania pęcherzyków oskrzelowych (BAL) peletki komórek z ADA. /. myszy (Figura 1C). Badania lokalizacyjne wykazały, że transkrypty A1AR nie były wykrywalne w płucach myszy ADA +; jednak transkrypty A1AR były wykrywalne w różnych typach komórek w płucach ADA. /. myszy. Sygnał hybrydyzacji wykryto w większości makrofagów pęcherzyków płucnych (Figura 1E) w płucach ADA. /. myszy z sygnałem okazjonalnym znajdującym się w komórkach śródbłonka, komórkach nabłonka dróg oddechowych i komórkach nabłonka pęcherzykowego (dane nie pokazane). Te wyniki pokazują, że transkrypty A1AR są podwyższone w wielu typach komórek w płucach ADA. /. myszy. Figura 1A1AR ekspresja w płucach ADA. /. myszy. (A) Poziomy transkryptu dla A1AR mierzono w ekstraktach RNA z całych płuc z myszy 18-dniowych, zawierających ADA (ADA +) i z niedoborem ADA (ADA A / p), stosując półilościowy RT-PCR. Znaleziono wyniki z 2 różnych par miotowych. RNA wyekstrahowany z mózgu myszy ADA + zastosowano jako kontrolę pozytywną, a P-aktynę stosowano jako kontrolę dodatnią dla RNA dla każdej próbki. M, drabina wielkości DNA. Ilościowy RT-PCR zastosowano do określenia poziomów transkryptów A1AR w ekstraktach z całych płuc z całych 18 dni (B) lub peletek komórek BAL (C) z ADA + i ADA. /. myszy. Dane przedstawiono jako średni procent transkryptów p-aktyny. SEM; n = 4 dla każdego. * P. 0,05 w porównaniu do ADA +. nd, niewykrywalne. Obrazy pokazują (D) odcinek płuca od dnia po urodzeniu 18 Mysz ADA + hybrydyzuje z rybosoneczką antysensowną A1AR, (E) sekcję płuc z dnia po urodzeniu 18 ADA. /. mysiej hybrydyzuje się z rybosoneczką antysensowną A1AR i (F) sekcją płuc z dnia 18 po urodzeniu ADA. /. mysiej hybrydyzuje się z rybosondą sensowną A1AR. Fiolet reprezentuje specyficzną hybrydyzację; różowy pokazuje zabarwione przeciwciałem jądra. Strzałki oznaczają makrofagi pęcherzykowe. Pasek skali: 10. M Zapalenie płuc zaostrza się u myszy z podwójnym nokautem ADA / A1AR. ADA. /. u myszy rozwija się zapalenie płuc w dniu 10 po urodzeniu, gdy wzrost makrofagów pęcherzykowych jest najbardziej znaczącą cechą (11)
[przypisy: sok z malin przepis babci, jak przygotować się do badania usg jamy brzusznej, taniec użytkowy kroki ]
[hasła pokrewne: multimed okopowa, diohespan forte, ile kalorii ma chleb orkiszowy ]