Ochronna rola receptora adenozynowego A1 w urazie płucnym zależnym od adenozyny ad 5

Myszy utrzymywano na terapii enzymami ADA przez pierwsze 17 dni życia; następnie przerwano terapię, a końcowe punkty płucne zbadano 14 dni później. Badanie poziomów adenozyny u myszy leczonych w ten sposób wykazało, że poziomy adenozyny w płucach nie są podwyższone w płucach ADA. /. myszy 3 dni po ustaniu terapii enzymem ADA, ale są wyraźnie podwyższone 14 dni po leczeniu (Figura 8). Badanie płucnych punktów końcowych 14 dni po ustaniu terapii enzymatycznej ADA ujawniło podobne zmiany zapalne, zwiększoną produkcję śluzu i wzrosty poziomu cytokin i chemokin, jak widać w ADA. /. myszy w dniu 14 po urodzeniu (dane nie pokazane). Co więcej, zwiększone zapalenie, wytwarzanie śluzu i opracowanie cytokiny i chemokiny zaobserwowano w ADA. /. myszy pozbawione A1AR (dane nie pokazane). Analiza zniszczenia pęcherzyków w ADA. /. myszy 14 dni po ustaniu terapii enzymatycznej ADA wykazano znaczny wzrost wielkości pęcherzyków (Fig. 9, C i E). Stopień powiększenia dróg oddechowych znacznie wzrósł w płucach ADA. /. myszy pozbawione A1AR (Figura 9, D i E). Następnie zbadaliśmy ekspresję kluczowych mediatorów proteolitycznych w płucach tych myszy. Ekspresja MMP-9 była podwyższona w płucach ADA. /. myszy zi bez A1AR (Figura 9F), podczas gdy ekspresja MMP-12 nie była podwyższona w płucach ADA. /. myszy, które zawierały A1AR, ale znacznie wzrosły w płucach myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR. Odkrycia te wykazują, że występuje zwiększona ekspresja MMP-12 i zniszczenie pęcherzyków płucnych u myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR. Ryc. 8 Ocena poziomów adenozyny w płucach za pomocą terapii enzymatycznej ADA. ADA. /. myszy utrzymywano na terapii enzymatycznej ADA do dnia 17 po urodzeniu, jak opisano w Metodach. Poziomy adenozyny w całym płucu mierzono u myszy po 3 i 14 dniach po ustaniu terapii enzymem ADA. Dane przedstawiono jako średnia nmol adenozyna / mg białka. SEM; dzień 3, n = 4; dzień 14, n = 7 * P. 0,05 w porównaniu do myszy ADA +; ** P. 0,05 w porównaniu z myszami ADA p / AlAR + / +. Figura 9 Awaryjne zniszczenie u myszy z podwójną nokautem ADA / A1AR. ADA. /. myszy traktowano enzymatyczną terapią ADA od urodzenia do dnia 14 po urodzeniu, jak opisano w Metodach. Płuca od ADA. /. Myszy i dobrane wiekiem myszy ADA + zebrano 14 dni po zaprzestaniu terapii enzymem ADA i poddano obróbce pod kątem barwienia H & E. Obrazy pokazują (A) płuca z myszy ADA + A1AR + / +, (B) z ADA + A1AR. /. mysz, (C) płuco od myszy ADA p / a .AAR + / +, i (D) płuco od ADA p / a 1ARa /. mysz. Obrazy są reprezentatywne dla 10 zwierząt z każdej grupy. Pasek skali: 100 .m. (E) Wielkość pęcherzyków płucnych obliczono przy użyciu Image-Pro Plus (Media Cybernetics). Dane przedstawiono jako średnią długość kabla. SEM; n = 5 (F) Poziomy transkryptów MMP-9 i MMP-12 określono w ekstraktach z całych płuc z myszy po 14 dniach po urodzeniu, stosując ilościowy RT-PCR. Dane przedstawiono jako średnie pg transkryptów / | g RNA. SEM; n = 8 dla każdego. * P. 0,05 w porównaniu do myszy ADA +; ** P. 0,05 w porównaniu z myszami ADA p / AlAR + / +. Dyskusja Usunięcie ADA z myszy stworzyło modelowy system do badania fizjologicznych konsekwencji elewacji adenozyny (32). ADA. /. u myszy rozwija się postępujące zapalenie płuc i przebudowa dróg oddechowych w połączeniu z podwyższonymi poziomami adenozyny. Zapobieganie lub cofanie poziomów adenozyny w płucach tych myszy przy użyciu terapii enzymatycznej ADA może zapobiegać lub odwracać obserwowane objawy zapalenia płuc i uszkodzenia (11, 31, 36). Te odkrycia sugerują, że adenozyna pełni prozapalną rolę w rozwoju uszkodzenia płuc. Jest to zgodne z proponowanymi rolami dla adenozyny w rozwoju i progresji chorób płuc, takich jak astma i POChP (5, 6, 37). Mechanizmy, dzięki którym adenozyna wywiera swoje funkcje w zapaleniu płuc, nie są dobrze rozumiane. Nasze podejście do badania wpływu adenozyny na uszkodzenie płuc miało na celu zbadanie roli specyficznych AR w fenotypach płucnych z udziałem adenozyny obserwowanych w ADA. /. myszy. W bieżącym badaniu zbadaliśmy rolę A1AR w tym modelu i stwierdziliśmy, że genetyczne usunięcie A1AR spowodowało nasilenie stanu zapalnego w płucach, metaplazję śluzu, zniszczenie pęcherzyków płucnych. i przedwczesna śmierć ADA. /. myszy, co sugeruje, że sygnalizacja receptora A1AR może odgrywać rolę przeciwzapalną i / lub ochronną dla tkanki w postępie choroby płuc. Te odkrycia dostarczają tego, co uważamy za pierwszy dowód na to, że A1AR odgrywa rolę ochronną w modelu, w którym poziomy endogennej adenozyny są podwyższone i sugeruje, że istnieje złożona zależność pomiędzy anty- i prozapalnymi szlakami adenozyny w progresji i utrzymanie przewlekłej choroby płuc. Na pierwszy rzut oka może się wydawać, że istnieje paradoks pomiędzy poprzednimi ustaleniami, pokazującymi, że obniżenie poziomu adenozyny może zmniejszyć zapalenie płuc i uraz w ADA. /. myszy (11) i bieżące wyniki wykazujące tha
[podobne: usuwanie tatuażu warszawa, excedrin migrastop opinie, telefon zaufania darmowy ]
[patrz też: aromactiv plastry, excedrin migrastop opinie, test ciążowy quixx ]