Mechanizm naprowadzania dla rekrutacji komórek progenitorowych szpiku kostnego do nowonaczyń czesc 4

Komórki CD34 + przylegają również do domeny CS-1 komórkowej fibronektyny w sposób zależny od integryny a4 m. Dla porównania, CD34. komórki jednojądrzaste wyrażają także wysokie poziomy integryny a4 .1 i przylegają do śródbłonka i fibronektyny CS-1 w sposób zależny od A 4. Integryna a (3l pośredniczy w adhezji komórek progenitorowych do śródbłonka in vivo. W celu określenia, czy integryna a ^ P pośredniczy w komórce progenitorowej CD34 + lub CD34. przywleczenie komórek jednojądrzastych do śródbłonka in vivo, znakowane fluorescencyjnie komórki wstrzyknięto nagim myszom z guzami N202 w obecności antagonistów integryny. Analiza poporodowa tych nowotworów izolowanych w ciągu 60 minut po wstrzyknięciu komórek potwierdziła, że przeciwciało anty -ArA1 hamowało zatrzymanie komórek CD34 + w obrębie nowotworów (Figura 4, A i B). Podobnie, znakowane fluorescencyjnie komórki CD34 + wstrzyknięto nagim myszom z nowotworami raka płuc Lewisa (LLC). Analiza poporodowa tych nowotworów izolowanych w ciągu 60 minut po wstrzyknięciu komórek CD34 + wykazała, że komórki progenitorowe zostały zatrzymane na obrzeżach guzów LLC (Fig. 4C). Niewiele ludzkich komórek obserwowano w centrach nowotworowych (dane niepokazane). Przeciwciała anty-A ^ (3, ale nie antagoniści innych integryn, w tym integryny avp3 (figura 4, C i D) i avp3 (nie pokazano), znacznie zmniejszone gromadzenie komórek progenitorowych w nowotworach. Antagoniści przeciwciał ludzkiego a4 (3 hamowali także naprowadzanie CD34a. komórki do N202 naczyń nowotworowych. Obrazowanie w mikroskopii wewnątrzwitalnej w ciągu 30 minut wykazało, że brak CD34. komórki aresztowano w naczyniach nowotworowych w obecności przeciwciał anty-integryny a36A (Figura 4, E i F). Podczas gdy komórki progenitorowe CD34 + i CD34. komórki zadomowiły się istotnie w nowotworach, żaden typ komórek nie znalazł się w pobliżu sąsiadujących zdrowych tkanek, w płucach (Suplementowa Figura 4) lub w szpiku kostnym (nie pokazano). Przeciwnie, wstrzyknięte dożylnie komórki nowotworu jajnika chińskiego chomika wyrażające integrynę a4 (3 były uwięzione wyłącznie w płucach, a nie w nowotworach, co sugeruje, że krążące komórki pochodzące ze szpiku kostnego specyficznie są domem dla układu naczyniowego guza. Badania te wskazują, że integryna a4P reguluje naprowadzanie ludzkich komórek progenitorowych szpiku kostnego i innych jednojądrzastych komórek do układu naczyniowego in vivo. Wyniki te dyskontują niespecyficzny wyciek komórek z naczyń nowotworowych jako sposób wyjaśnienia tych wyników, ponieważ komórki progenitorowe nie gromadzą się w centralnych naczyniach nowotworowych, a komórki guza eksprymujące integrynę a4 (31 nie gromadzą się w nowotworach. Figura 4Integrina-4p> reguluje CD34 + i CD34. celowanie komórkowe do układu naczyniowego guza. (A) Kriozawiesięcia nowotworów piersi N202 od myszy, którym wstrzyknięto komórki CD34 + (czerwone, groty strzałek) oraz przeciwciała solne lub anty-ludzkieA4A1. Naczynia krwionośne zidentyfikowano przez wybarwienie CD31 (zielone, strzałki) i komórki CD34 + przez znakowanie CMTMR (czerwone). (B) Średnia liczba komórek CD34 +. SEM na × 200 pola. * P <0,0007. (C) Krioskrawki raka płuca LLC u myszy, którym wstrzyknięto komórki CD34 + (czerwone, groty strzałek) i solankę, przeciwciała antyludzkie a4 .1 lub dopasowane do izotypu przeciwciało anty-integryny kontrolnej (cIgG, anty-av v3 ). Naczynia krwionośne zidentyfikowano przez barwienie CD31 (zielone, strzałki). (D) Średnia liczba komórek CD34 +. SEM na × 200 pola. ** P <0,0006. (E) Mikroskopia wideo guzów u zwierząt, którym wstrzyknięto CD34. Znakowany CMTMR komórki ludzkie w obecności soli fizjologicznej, anty-p-4, lub dopasowanego pod względem izotypu kontrolnego przeciwciała antyintegrynowego (anty-avp3). (F) Średnia liczba CD34. komórki . SEM na × 200 pola.