Gas1 jest modyfikatorem holoprosencephaly i genetycznie współdziała z dźwiękowym jeżem ad 6

Jednakże zaobserwowano znaczny spadek odsetka komórek mezenchymalnych proliferujących w środkowym i tylnym rejonie półek podniebiennych na wierzchołku (42% dla obu, P <0,001) i wygięcia (odpowiednio 40% i 32%; 0,001) w Gas1. /. w porównaniu z zarodkami WT (ryc. 6, G i H). Zatem, w nieobecności funkcji Gas1, zmniejszenie transkrypcji Ptc1 w mezenchymie zarówno podniebiennego wierzchołka, jak i zgięcia było związane ze statystycznie znaczącym zmniejszeniem proliferacji komórek w tych regionach. Figura 6 Rozprzestrzenianie komórek w rozwijającym się podniebieniu WT i Gazyl. /. myszy. (A. F) Analiza BrdU E13.5 WT i Gas1. /. podniebienne półki. W B, górne i dolne pola identyfikują obszar komórek mezenchymalnych, liczonych odpowiednio w podniebieniu podniebiennym i wierzchołku; górna i dolna linia przerywana przedstawiają regiony komórek nabłonkowych policzonych odpowiednio na zgięciu i wierzchołku. Pasek skali: 125 .m. (G i H) Procent inkorporacji BrdU dla każdego badanego obszaru. Proliferacja była znacznie zmniejszona w nabłonku środkowego i tylnego wierzchołka oraz mezenchymu środkowego i tylnego wierzchołka oraz zgięcia. a, przednie podniebienie; m, średnie podniebienie; p, podniebienie tylne. Dane są średnie. SD. n = 4 myszy na grupę analizowano dla każdego stadium zarodkowego (liczono łącznie 45 WT i 55 fragmentów Gas1 (3 / y). * P <0,05 względem WT. Gas1 i Shh genetycznie oddziałują. Dane te sugerują, że Gas1 jest w stanie pozytywnie regulować przekazywanie sygnałów Shh i że ta aktywność jest istotna dla sygnalizowania w pewnej odległości od źródła transkrypcji. Oczywiste jest, że brak funkcji Gas1 miał poważne konsekwencje dla normalnego rozwoju linii środkowej regionu twarzoczaszki. W celu ustalenia, czy Gas1 i Shh oddziałują genetycznie, przeanalizowaliśmy fenotyp czaszkowo-twarzowy myszy pozbawionych jednego allelu Shh w Gazie. tło. Indywidualnie, zarówno Gas1 + /. i Shh + /. myszy były fenotypowo normalne w obszarze twarzoczaszki; jednak utrata allelu Shh w Gas1. /. tło powodowało coraz bardziej zaawansowany fenotyp HPE. Gas1. /. Shh + /. zarodki przetrwały do urodzenia, ale miały tylko jedno zewnętrzne nozdrze, natomiast Gas1. /. Shh. /. myszy miały poważne wady czaszkowo-twarzowe i tylko przeżyły do około E9,5 (danych nie pokazano). Wskazanie istotnej interakcji genetycznej, Gas1. /. Shh + /. okołoporodowe czaszki wykazywały zaostrzone uszkodzenia neurowłóknowe, splanchnocialiczne i dermatocenialne w porównaniu do Gas1. /. pojedyncze mutanty, jak również znaczące i nowe defekty tworzenia się wzorów i rozwoju (Ryc. 7). Ryc. 7 Demonstracja genetycznej interakcji między Gazem i CII. (A. D) Porównanie Gas1 + /. Shh + / ., Gas1 (3 /. Shh + / + i 2 Gas1 (3 /. Shh + /. okołoporodowe czaszki. Lewe 3 myszy były już młodymi. (A) Norma basalis. Czarna linia wyrównuje czaszki, które zostały sfotografowane w tym samym powiększeniu. (B) Norma lateralis. (C) Dentaries of Gas1 + / A Shh + / ., Gas1 (3 /. Shh + / +, i Gas1 (3 /. Shh + /. perinates. W szczególności, Gas1. /. Shh + /. oprócz fiksacji linii pośrodkowej i pojedynczego siekacza wykazywały coś, co wyglądało na powieloną proksymalną zębinę, która zawiera proces kłyksu z wtórną chrząstką (czarne strzałki) i zębodół zawierający molekuł ektopowy (zielona strzałka). Biała strzałka wskazuje ścięcie i bifurkację proksymalną chrząstki Meckela. Oryginalne powiększenie, × 4. (D) Kalwaria Gazu + / P Shh + / P, Gaz P, P + C + + i P1, P, P + P, C czaszki. Czarne groty podkreślają utratę patentowego szwu koronowego w calvarium of Gas1. /. Shh + /. czaszka. (E) Histologiczne odcinki rozwijającego się ektopowego trzonu (czerwona strzałka) i zębodołu. MC, chrząstka Meckela; oc, kapsułka na uszy. (F) Porównanie WT i gazu (3 /