Dominująco odziedziczył hiperinsulinizm wywołany mutacją receptora sulfonylomocznika typu 1 ad 7

Współczynnik Hilla był zbliżony do jedności (h = 0,96. 0,1; n = 4), jak stwierdzono wcześniej dla Kir6.2 / SUR1. Wartości IC50 i h, które zaobserwowaliśmy, są również podobne do wartości znalezionych dla natywnego. kanały komórkowe KATP (29, 30). Zatem dane te wskazują, że uszkodzenie kanałów Kir6.2 / SUR1-E1506K reagujących na hamowanie metaboliczne nie jest konsekwencją zmienionej wrażliwości ATP. Następnie zbadaliśmy wpływ MgADP na aktywność kanału Kir6.2 / SUR1-E1506K. Jak pokazano na fig. 6, a (ii) i b, 100. M MgADP zablokowało kanał o około 70%. Kontrastuje to z kanałami KATP typu dzikiego, w których MgADP stymuluje aktywność kanału o około 170% (Figura 6b). Brak aktywacji MgADP może przyczynić się do niepowodzenia hamowania metabolicznego w stymulowaniu prądów Kir6.2 / SUR1-E1506K w nienaruszonych oocytach. Ryc. 6 Wpływ MgADP, tolbutamidu i diazoksydu na prądy Kir6.2 / SUR1-E1506K. (a) Makroskopowe prądy Kir6.2 / SUR1-E1506K rejestrowane z poprawek wewnętrznych w odpowiedzi na serie ramp napięciowych od ~ 110 mV do +100 mV. Tolbutamid (100 .M), ADP (100 .M), diazoksyd (340 .M) i ATP (100 .M) dodano do wewnętrznego roztworu, co wskazano za pomocą słupków. (b) Średnia makroskopowa przewodność pochylenia zarejestrowana w obecności ATP, ATP plus diazoksydu, ADP lub tolbutamidu, wyrażona jako procent przewodności pochyłej w roztworze kontrolnym. Liczba oocytów jest podana powyżej słupków. Wstawka: średni makroskopijny przewodnictwo pochyłe rejestrowane w obecności 100 .M ATP plus 340 .M diazoksydu, wyrażone jako procent prądu w obecności 100 .M ATP dla Kir6.2 / SUR i Kir6.2 / SUR1-E1506K prądy. Linia przerywana wskazuje przewodnictwo w obecności 100. M ATP. Liczba oocytów jest podana powyżej słupków. Diazoksyd z otwieraczem kanału K jest zdolny do odwrócenia, prawie całkowicie, efektu hamującego 100. M ATP na kanale Kir6.2 / SUR1 typu dzikiego (Figura 6b). Diazoksyd był znacznie mniej skuteczny w kanałach Kir6.2 / SUR1-E1506K, chociaż zwiększył aktywność kanału w niewielkim stopniu (Figura 6, a [iii] ib). Widać to wyraźniej, gdy konduktywność zarejestrowana w obecności ATP i diazoksydu jest wyrażona jako procent zarejestrowanego w samym ATP (Figura 6b, wkładka). Chociaż reakcja na diazoksyd była niewielka, warto podkreślić, że ze względu na bardzo wysoką oporność wejściową. komórki, gdy kanały KATP są zamknięte, nawet bardzo mały prąd jest w stanie wytworzyć dużą hiperpolaryzację i tym samym hamować wydzielanie insuliny. Tolbutamid sulfonylomocznika zablokował prądy typu dzikiego i Kir6.2 / SUR1-E1506K podobną ilością (Figura 6, a [i] ib). W przeciwieństwie do większości mutacji CHI, heterozygotyczność dla E1506K jest wystarczająca do wywołania choroby. Aby ustalić, czy wynika to z dawkowania genu lub dominującego negatywnego efektu, zbadaliśmy wpływ koekspresji Kir6.2 z mieszaniną 1: SUR1 typu dzikiego i zmutowanego. Kontrolne oocyty zostały wspólnie wstrzyknięte z Kir6.2 i tym samym całkowitym stężeniem SUR1 typu dzikiego lub zmutowanego. Figura 4 pokazuje, że amplituda prądu KATP aktywowana przez hamowanie metaboliczne w oocytach eksprymujących Kir6.2 i mieszaninę 1: typu dzikiego i zmutowanego SUR1 była w przybliżeniu o połowę niższa dla oocytów eksprymujących kanały Kir6.2 / SUR1. Ponieważ stężenie mRNA SUR1 w mieszaninie mRNA wynosiło także około 50% stężenia w oocytach, którym wstrzyknięto sam SUR1, wynik ten wskazuje, że mutacja E1506K nie ma dominującego negatywnego działania. Dyskusja W większości przypadków przyczyną CHI jest mutacja recesywna w genie SUR1. Inne geny, które mogą powodować podobny fenotyp obejmują Kir6.2, glukokinazę i dehydrogenazę glutaminianową. Nasze analizy sprzężeń pokazują jednoznacznie, że CHI u opisywanych tu pacjentów zależy od dziedziczenia allelu E1506K genu SUR1. Analiza nieparametryczna wykazała, że obserwowane dzielenie się pacjentami i nieuczestniczenie w zdrowych szelach w dużym rodowodzie jest wysoce nieprawdopodobne, aby było spowodowane przypadkiem (P = 1,2 × 10. 7). Parametryczna analiza sprzężeń zaskakująco silnie wspierała tryb dominujący, a nie recesywny tryb dziedziczenia. Mechanizm dominujący, a nie recesywny, sugerowany jest również przez badanie haplotypów otaczających gen SUR1 u pacjentów. Dla wszystkich pacjentów inny haplotyp (nie posiadający wariantu E1506K) był inny; konkretnie, żaden z pacjentów nie był homozygotyczny pod względem allelu E1506K i otaczającego haplotypu. Jeśli fenotyp był spowodowany mechanizmem recesywnym, należałoby oczekiwać przynajmniej części zachowania haplotypów wśród pacjentów, ponieważ wszyscy pacjenci pochodzą z małej subpopulacji i rzeczywiście z różnych gałęzi dużego rodowodu.
[hasła pokrewne: badanie elektrofizjologiczne, proste kroki taneczne, telefon zaufania darmowy ]
[więcej w: betaserc opinie, rowatinex cena, relewium ]